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. 실험원리
Hadrazine 비색법의 원리는 시료를 metaphosphoric acid 용액으로 추출하여 일정용액으로 한 다음에, ①AA(환원형 비타민C)의 모두를 2,6-dichlorophenolindophnol(DCP)로 산화시켜서, dehydroascorbic acid(DAA, 산화형 비타민 C)로 만들고, 여기서 2,4-dinitrophenyhydrazine(DNP)용액을 가형 적색의 osazone을 생성시킨다.
이 osazone에 HSO용액을 가하여 탈수시키면 등적색의 무수물, 즉 bis-2, 4-dinitrophenyl hydrazine 으로 변환되어, 고농도의 황상 용액 중에서 안정된 정색 반응을 나타낸다. 이것을 파장 520nm로 흡광도를 측정하여 표준 AA의 정색과 비교하여 총 비타민C의 함량을 구한다.
② 별도로 준비한 일정량의 시료용액을 DCP로 산화를 행하지 않고, 원래 시료용액 중에 존재하는 산화형 DAA만을 측정한다. 이때 AA의 산화를 thiourea[CS(NH)] 또는 stannous chloride(SnCl)으로 방지하면서, ①과 같은 방법으로 측정하여 DAA 함량으로 한다. 이렇게 하여 얻은 DAA의 값을 총 비타민 C의 값으로부터 제하면 AA의 함량을 구할 수 있다.
비색법
목 적 : 환원당을 정량하기 위해서는 Dinitrosalicylic acid에 의한 비색법이 있다. 이 비색법이 어떻게 이루어지는지 알아보고, 실험시 주의해야 할점에 대해서도 알아보도록 한다. 5. 원 리 환원당은 알칼리성에서 3,5-dinitrosalicylic acid의 NO기를 ...
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